摘 要 | ||||||||||||||||||||||||||
病毒特性及流行病學:錦鯉疱疹病毒症(Koi herpesvirus disease)是由一種會引起錦鯉及鯉魚嚴重死亡的病毒引起,這種病毒是二十面體、具有封套的雙股DNA病毒。本病毒根據其型態暫定在疱疹病毒科。本病毒可感染錦鯉(Cyprinus carpio koi)及鯉魚(Cyprinus carpio carpio)並引起死亡,是否可感染他種魚類目前不明。本病於1998年最初發生於以色列,同年傳至美國;2000年傳至英國、德國及比利時;2001年日本外銷英國錦鯉被分離出此病毒(惟日本國內並無發生報告);2002年中國大陸及印尼疑似發生本病。本病之快速傳播似乎與感染帶原的活魚在各國間運輸販賣有關。 診斷:本病發生於所有年齡的錦鯉,接觸感染源後7-10天內會發病,死亡率高達80-100%。發病魚外觀並無任何特異病變,僅鰓部有潮紅、腫脹、白色斑塊及出血,有時可見鰭及尾充血。本病之診斷可透過組織病理學檢查,確診則須配合病毒分離、電子顯微鏡檢查、聚合酵素鏈反應或核酸序列比對來完成。 預防控制:本病之預防包括勿引進感染帶原的錦鯉、魚場的人員進出管制、自家消毒及迅速送檢可疑病例俾便及早處理。控制方法為撲殺所有罹病池之魚類、嚴密消毒、空池曝曬、引進健康的魚隻。本病目前並無治療方法。 我國目前狀態:我國錦鯉於2002年12月由家畜衛生試驗所確定發生本病,其後仍有病例報告,顯示各錦鯉及鯉魚飼養場應加強預防與控制。 | ||||||||||||||||||||||||||
一、病因 雖然學者有不同看法,本病暫定由錦鯉疱疹病毒(koi herpesvirus)引起,屬於疱疹病毒科(Herpesviridae)。1998年,本病最早正式報告發生於以色列,可感染任何年齡之錦鯉及鯉魚,死亡率高達80%以上,水溫高於18 ℃以上就會發生。本病毒可藉水平感染傳播,是否可透過垂直感染尚不明;罹患本病殘存之魚類會變成帶病毒者。 2002年12月,由農委會家畜衛生試驗所在發病錦鯉病材中,經病理變化、原位雜交法及核酸序列比對方法確定本病毒已入侵我國。 二、流行病學 1998年,首次報告本病最初爆發於以色列,該批錦鯉由歐洲進口,共損失超過600噸的鯉魚及400萬美金的錦鯉(Hedrick et al. 2000);同年美國東岸一錦鯉養殖場魚參加錦鯉品評會後爆發本病。2000年英國、德國、比利時均有發生報告(Way et al. 2001,Hoffman et al. 2001)。2001年11月,日本輸英國錦鯉被分離出此病毒,惟日本國內並無發生報告(Amita et al. 2002)。2002年3月,中國廣東省錦鯉品評會發生大量死亡之疑似本病案例。同年6月印尼提報世界動物衛生組織(OIE)該國爪哇島之錦鯉疑似發生本病(Rukyani A. 2002)。 2002年12月,我國錦鯉確定感染本症,本病之入侵,推論應與輸入感染的帶原活魚有關。目前我國台北縣、台北市、桃園縣均有疫情傳出。 三、宿主範圍 目前僅知會造成錦鯉(Cyprinus carpio koi)及鯉魚(Cyprinus carpio carpio)感染致死。其他種魚類是否會感染或成為帶原者,目前尚無研究報告。至92年3月止,我國本病病例僅發生於錦鯉。 四、臨床症狀 健康魚類在接觸病原7-10日後發病,初期少量死亡,2至4日後開始出現大量死亡,死亡率可達80-100%。罹病魚最初出現游動遲緩然後死亡,未急性死亡病魚可見鰭及尾充血(圖一),鰓部會出現潮紅、腫脹及一些白色斑塊(壞死的細胞),伴隨著黏液增加,嚴重者鰓部會出血,引起池水變紅(圖二)。病程若再拖久,有些病魚,體表會出現白色、灰色的斑塊,更嚴重者會造成潰瘍。有時可見病魚眼框凹陷,出現奇怪的泳姿,如頭上尾下隨波逐流,或突然狂奔急游(Hedrick et al. 2000)。 五、組織病理學 主要的顯微病變在鰓,可見鰓上皮細胞增生、細胞核肥大、局部壞死、於壞死細胞可見核內包涵體;鰓二級薄板會造成癒合。腎臟、心臟、胰臟、胃及腸均可見局部壞死及核內包涵體。偶而於腦部神經原細胞亦可見到核內包涵體(圖三、四)。 六、診斷方法 可以將乳劑接種錦鯉鰭細胞株(KF-1)(Hedrick et al. 2000),培養在20 oC,7天後可見感染細胞聚集(aggregate),其胞質內出現嚴重空泡化(vacuolization)的細胞病理變化(CPE)。其上清液負染色在電子顯微鏡下檢查可見110 nm 大小的病毒顆粒(圖五)。 若無細胞株可用,可以直接萃取鰓、腎乳劑DNA並以本病毒特有的引子(KHV9/5F 5'-GACGACGCCGGAGACCTTGTG-3', KHV9/5R 5'-CACAAGTTCAGTCTGTTCCTCAAC-3)進行聚合酵素鏈反應,其反應條件為2 mM MgCl2,400 um deoxynucleotide triphosphate,30 pmol primers,1U Taq polymerase,template: 70-100 ng DNA。反應時間為95oC 5 分,然後進行39次增幅(每次包括94oC 1分,68oC 1分,72oC 30秒),最後進行72oC 7分的延長(Gilad et al. 2002)。將其大小為484 bp的產物定序與基因庫中錦鯉疱疹病毒序列(GenBank, accession number AF411803)比對,再加上前述特徵性的病理變化可以確診。 七、防治方法 (一)預防:
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